Page 11 - Pause Cafe 63호
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TEST            Direct disk diffusion
                                 Interpretive Categories
                                   and Zone Diameter
                                                                 1.  불규칙적인 성장 패턴을 보일 경우에는 결과 값을
           Enterobacterales  Disk Content  Breakpoints, nearest   해석하거나 보고하지 않으며, colony를 이용해서
                                                                  standard susceptibility test를 수행한다.
                                                        추가 검사
                                     whole mm                    2.  자연 내성의 경우에는 zone 의 크기에 상관없이
                                                         및 보고
                                                                  내성으로 보고한다.
                                  S      I     R                 3.  두 개의 zone 이 관찰될 경우, 단일균주인 경우
                                                                  Inner zone의 직경을 측정할 것을 권장한다.
             Ampicillin  10 µg   ≥17   14-16^  ≤13
                                                          QC     E. coli ATCC 25922
             Aztreonam   30 µg   ≥21   18-20^  ≤17
                                                                           (CLSI M100-E31, Table 3E, page 148-149)
             Ceftazidime  30 µg  ≥21   18-20^  ≤17
             Ceftriaxone  30 µg  ≥23   20-22^  ≤19
                                                      6. 검사 방법 변경 사항 – Cefiderocol
             Tobramycin  10 µg   ≥15   13-14^  ≤12
            Trimethoprim-  1.25/  ≥16   11-15  ≤10    Cefiderocol을 검사하기 위해서는 iron-depleted CAMHB가 필요하다.
            sulfamethoxazole  23.75 µg
                                                      킬레이트화는 철 성분을 제거하기 위해 사용되는데 이때 다른 양이온
                               (CLSI M100-E31, Table 2A, page 34-46)  (칼슘, 마그네슘, 아연)도 함께 제거되기 때문에 다시 칼슘 20-25 mg/L,
                                                      마그네슘 10-12.5 mg/L, 아연 0.5 – 1.0 mg/L를 첨가하여 검사를 진행
          양성 혈액 배양액으로 직접 접종법으로 디스크 확산 감사 방법은 다음       한다. 이에 따라 부록 I에 Cefiderocol 검사를 하기 전에 증류수에 철 성
          과 같다.                                       분이 0.03 mg/L 이하인지를 확인하는 문구가 새롭게 추가되었다.

             TEST             Direct disk diffusion
             배지     MHA

           항균제 농도   위의 Table 2A의 Disk Content 참조

                    그람 음성 간균 양성 혈액 배양 배지,
             접종
                    양성 검출 8시간 이내의 배지를 사용.
                    1.  혈액배양 양성 보틀을 5번에서 10번 정도 잘 섞어
                      준다. (Invert mix)
                    2.  보틀 접종부분을 소독한 후, 20 gauge
                      주사기를 이용하여 배양액을 취한다.
                    3.  MHA 배지 위에 4 방울 정도 배양액을
                      떨어트린다. 단일 균인지 확인하기 위해서 BAP 에
                      도 접종하며, 면봉으로 획선 도말한다. 배지                             (CLSI M100-E31, Appendix I, page 290)
            검사 과정     전체에 균일하게 미생물이 자라도록 한번에 배지
                      전체에 도말하고, 60° 회전하여 다시 도말한다.
                      모든 방향에서 이 과정을 반복한다.
                    4.  배지가 마르도록 3-5분 동안 가만히 둔다.
                      (15분을 초과해서는 안된다)                7. 부록 H3. ESBL and Carbapenemase Test
                    5. MHA 배지 위에 디스크를 올린다.
                    6.  디스크를 올리고 15분 이내에 배양기로
                      옮겨 배양한다.

             온도     35°C±2°C, ambient air

            배양 시간   16~18 hours

                    1.  BAP purity plate에서 먼저 단일균주 여부를 확인
                     한다.
                    2.  만일, 그람음성간균이 장내세균목으로 확인이 되었
             판독
                     을 경우, Table 2A의 해석 기준에 따라 결과를 해석
                     하고 보고한다. 장내세균목 이외의 균종으로
                     동정되는 경우에는 결과 해석, 보고하지 않는다.
                                                                     (CLSI M100-E31, Appendix H., Table H3, page 285)
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